超高通量基因组测序系统Genome Sequencer FLX System

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基因测序仪

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产品名称:超高通量基因组测序系统Genome Sequencer FLX System

产品型号:Genome Sequencer FLX System

产品展商:博仪兴业

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超高通量基因组测序系统Genome Sequencer FLX System的详细介绍

超高通量基因组测序系统

强大的罗氏第二代超高通量基因组测序系统GS FLX，配备全新的GS FLX Titanium系列试剂，加速生命科学各个领域的快速发展。

GS FLX系统具备专业的分析工具，涵盖用于图谱绘制、序列拼接和扩增子变异检测等各类简单、易操作的图形用户界面(GUI)。测序读长更长，

■ 平均可达400-500bp(图1)；

■ 通量更高，每单次运行可获一百万条高质量数据；

■ 速度更快，完成一次测序仅需10小时；

■ 准确率更高，单条读长超过400bp时，测序准确率仍高于99.6% ；

■ 多倍覆盖下，准确率高于99.99%。

灵活的GS FLX系统，突破更多的应用领域

■ 全新基因组测序和序列拼接

■ 重测序和图谱绘制

■ 转录组分析

■ 表观遗传学变异检测

■ 宏基因组学和微生物多样性

■ 古生物DNA

■ 病毒基因组测序

■ HIV 测序

■ 扩增子重测序

上样及样品DNA片断化

GS FLX系统支持各种不同来源的样品序列测定：包括基因组DNA、PCR产物、BACs和cDNA等等。基因组DNA和BACs等样品需被打断至600-900bp的小片断。对于像非编码RNA或PCR扩增子等小分子样品，则不需要这一步。而通过GS融合引物扩增得到的短片段PCR产物可以直接将其固定于DNA捕获磁珠上，如下文“一个片段=一颗磁珠”中所示。

文库的制备

利用分子生物学技术，将3'和5'端的特异性接头(A和B)连接至每一条DNA片断两端。这些接头将被用于之后的纯化、扩增及测序步骤。含有接头A、B的单链DNA片

断即构成了工作流程中的DNA文库。(其中GS FLX Titanium 系列试剂盒提供的接头A和B片段不同于GS FLX 标准系列试剂盒提供的)。

一个片段 = 一颗磁珠

单链DNA文库被固定于特殊设计的DNA捕获磁珠上。特异接头使各条DNA 片段分别结合于各自唯一的磁珠之上。结合有不同DNA的磁珠文库经油水混合的扩增试剂

乳化分散后，形成成百上千颗微乳滴，每一微乳滴内仅含有一颗磁珠和一条特异的样品DNA片段。

emPCR 扩增(乳滴PCR)

每一DNA片段在其各自的微乳滴中进行独立扩增，排除了其它竞争性或污染性序列对PCR反应的影响。所有DNA片段平行扩增，各个磁珠上的不同DNA片段均获得数

百万个扩增拷贝。随后，打破微乳滴，得到结合于各磁珠的特异扩增片断。

一颗磁珠 = 一条读长

将所有结合有DNA片段的磁珠置于PicoTiterPlate(PTP板)中进行测序。PTP板的孔径恰好仅能容纳一颗磁珠。将PTP板置于GS FLX测序仪中，单个核苷酸依次流经孔洞

和DNA捕获磁珠间。当所加入的一种或多种核苷酸与模板互补时，便产生化学发光信号，进而被 GS FLX系统的CCD相机记录。