鼠肝蛋白质组的纳升级多维液相色谱分离

色谱峰：鼠肝组织中提取蛋白、鼠肝组织酶解多肽

色谱条件：　色谱仪:安捷伦1100(Agilent1100);色谱柱:Hypersil30nm,C18(416mmi1d1×200mm,5μm)(大连依利特公司);流动相A:H2O2ACN2TFA(体积比为95∶5∶0.1)溶液;流动相B:H2O2ACN2TFA(体积比为5∶95∶011)溶液;流速:110mL/min;梯度程序:40min内从0%B线性增加至100%B,继续用100%B清洗10min;检测波长:280nm。----------------　二维色谱条件：色谱仪:安捷伦1100(Agilent1100);色谱柱:Hypersil30nm,C18(416mmi1d1×200mm,5μm)(大连依利特公司);流动相A:H2O2ACN2TFA(体积比为95∶5∶0.1)溶液;流动相B:H2O2ACN2TFA(体积比为5∶95∶011)溶液;流速:110mL/min;梯度程序:40min内从0%B线性增加至100%B,继续用100%B清洗10min;检测波长:280nm。　色谱仪:安捷伦1100(Agilent1100);色谱柱:Hypersil30nm,C18(416mmi1d1×200mm,5μm)(大连依利特公司);流动相A:H2O2ACN2TFA(体积比为95∶5∶0.1)溶液;流动相B:H2O2ACN2TFA(体积比为5∶95∶011)溶液;流速:110mL/min;梯度程序:40min内从0%B线性增加至100%B,继续用100%B清洗10min;检测波长:280nm。　色谱仪:安捷伦1100(Agilent1100);色谱柱:Hypersil30nm,C18(416mmi1d1×200mm,5μm)(大连依利特公司);流动相A:H2O2ACN2TFA(体积比为95∶5∶0.1)溶液;流动相B:H2O2ACN2TFA(体积比为5∶95∶011)溶液;流速:110mL/min;梯度程序:40min内从0%B线性增加至100%B,继续用100%B清洗10min;检测波长:280nm。

检测器：UV（紫外光检测器）

色谱柱Hypersil C18 (ODS)

色谱柱规格200mm * 4.6mm * 5.0μm

色谱柱厂家ThermoHypersil-Keystone公司

仪器厂家 / 仪器名称：Agilent 1100

参考资料：该方法搭建了一个纳升级的二维液相色谱分离平台( nano22D2LC) ,该平台可以自动完成进样、除盐、分离及鉴定。以离子交换色谱(SCX) 为第一维,反相液相色谱(RPLC) 为第二维,对鼠肝组织的蛋白质组进行了研究。SCX 采用阶梯式洗脱,RPLC 运用线性梯度洗脱,以200 nL/ min的速度进行分离,峰容量可达620 。