在96孔板的各孔中以30ng human DNA作为扩展模板,用SYBR Green I染料法扩增并检测110bp的beta globin基因外显子(A),并结合熔解曲线验证产物特异性(B)。96个孔间Cq值的变异系数极小(Cq range = 0.16,SD = 0.033),各扩增子之间的熔解曲线高度重合,表明了反应孔间温度均一性极佳。
(C) 使用#137,一个Parvo B19基因片段A对Parvo B19基因片段进行100-109十倍梯度稀释,通过应用UniversalProbeLibrary (UPL) Probe #137进行探针法检测。每个稀释梯度进行10个重复样品的检测(4个最高浓度的稀释进行9个重复样品检测)。实验结果表明,极低拷贝数的样本具有理想的重复性和分辨率。
(D) 使用人类基因组DNA做模板,用终点法做基因分型分析并检测68 bp ADD1基因片段。通过FAM和VIC标记的水解探针进行扩增和检测。从得到的散点图中可以准确地将野生型、突变型及杂合子进行区分。(绿色=野生型,蓝色=突变型, 橘黄色=杂合子)。