DPCR

数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术在单基因遗传病无创产前诊断中的应用

数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术在单基因遗传病无创产前诊断中的应用

微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术是一种可对DNA或RNA进行定量及定性的新型的检测技术,其原理为将一普通扩增反应体系微滴化,生成上万个油包水的扩增反应微滴体系,扩增后对每个微滴进行靶分子的检测,最后统计不同阳性微滴的数量进行定性或定量的计算。与实时荧光定量PCR相比,ddPCR不通过扩增曲线进行定量,不受扩增效率的影响,保证了ddPCR在痕量样本、低频突变、拷贝数变异等检测上的准确性、灵敏性和稳定性。目前数字PCR在肿瘤基因检测、无创DNA检测、基因拷贝数变异等领域开始得到的应用,但在单基因遗传病的无创产前检测方面报道较少。我们通过提取孕妇外周血血浆中游离核酸(cell-free DNA, cfDNA),应用ddPCR技术检测孕妇外周血cfDNA中胎儿游离核酸(cell-free fetal DNA, cffDNA)以确定胎儿是否遗传了父亲的致病基因突变位点。